男人边吃奶边做好爽视频-无码人妻精品一区二区三区99不卡-国产suv精品一区二区33-欧美巨鞭大战丰满少妇

資料下載

Data download

當前位置:首頁資料下載L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽說明書,L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽資料

L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽說明書,L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽資料

發布時間:2013/3/14點擊次數:749

1.為了洗脫細菌,將BL21或BLT5615過夜培養的菌液用M9LB稀釋到在600nm處OD值為1。如果使用BLT5615菌株與T7Selectl—1或T7Selectl0—3載體,就必須向菌液中加入IPTG,使其終濃度為10umol/L。

2.將900/21該菌液加到裂解后的細胞中,于室溫下孵育10分鐘。

3.為了測定T7噬菌體的產出量,從步驟2的試管中分別取1ul 1:10稀釋液、1ul原液和10ul原液鋪板,每種鋪3個:分別取1ul 1:10稀釋液、1ul原液和10ul原液加入14ml 聚苯乙烯管中, 同時還加入300rrl的BL21或BLT5615(含IPTG) 菌液,并與4ml熔化的(45~50℃)上層瓊脂混合。將含有噬菌體和細菌的上層瓊脂倒于LB瓊脂(BL21)平板上,或是倒在含50gg/ml羧芐青霉素的LB瓊脂(BLT5615)平板上。將平板置于37℃孵育1,5~3小時,或室溫下孵育過夜。

4.為了測定每份器官或組織的噬菌體總的產出量,將每個平板上的噬菌斑(pfu)數目除以鋪板體積(0.1ul、1ul或10ul),然后再乘以1000ul。這樣計算的原因是每份細胞沉淀中添加了1000gl菌液。例如:在腦組織的1ul培養基平板中平均有200pfu的噬菌體,那么在腦組織中噬菌體總產出量為2.0×105pfu/g。對每份器官和組織中的3個平板的計數取平均值,對數據作圖。

5.為了擴增及純化回收的T7噬菌體,將步驟2所剩的噬菌體加到10ml在600nm處OD值為0.5的BL21或BLT5615(加有10mmol/L的IPTG) 菌液中。于37℃搖瓶培養2小時,直到菌液被裂解并變澄清。

6.將菌液倒入30ml的Oak Ridge離心管中,并在Sorvall SS—34或同等的轉子中, 以8000r/min(7670g)離心10分鐘。通過帶0,2um濾頭的注射器將每份上清分別過濾到50m1無菌錐形瓶中,并保存于4℃。T7培養物上清典型的滴定量為107pfu/ul。我們采用T7溶菌液直接進行下面的實驗,而沒有用沉淀法進行進一步的純化。

www.dl-yll.com

文件下載    
主站蜘蛛池模板: xx性欧美肥妇精品久久久久久| 丰满人妻熟妇乱又伦精品| 丰满人妻熟妇乱又伦精品软件| 日日躁夜夜躁狠狠躁超碰97| 精品无码人妻一区二区三区| 人人天天爱天天做天天摸| 人妻丰满熟妇岳av无码区hd| 美女张开腿黄网站免费| 国产精品久久久久9999赢消| 欧美日韩精品久久久久| 精品久久久无码人妻中文字幕豆芽 | 亚洲av中文无码乱人伦在线咪咕| 免费a级毛片无码免费视频app| 色一情一区二| 亚洲欧美综合区丁香五月小说| 蜜芽国产尤物av尤物在线看| 99精品久久99久久久久| 国产精品亚洲欧美大片在线观看| 亚洲阿v天堂在线| 人妻仑乱a级毛片免费看| 欧美熟妇性xxx交潮喷| 亚洲精品成人久久久| 人妻夜夜爽天天爽一区| 野花社区www高清视频| 成人女毛片视频免费播放 | 丁香五月欧美成人| 亚洲综合无码一区二区三区| 国产丰满麻豆vⅰde0sex| 少妇人妻大乳在线视频| 亚洲三区在线观看无套内射| 性aa无码天堂| 亚洲av毛片一区二区三区| 国产无遮挡又黄又爽在线视频 | 2021在线精品自偷自拍无码| 成年大片免费视频| 野外性史欧美k8播放| 亚洲精品成a人在线观看| 99久久精品免费看国产| 无码手机线免费观看| 好吊妞国产欧美日韩免费观看| 国产免费无码av片在线观看不卡|